(一)材料和方法本實驗通過Ames試驗,骨髓染色體畸變分析和顯性致死試驗鑒定聚氯化鋁的致突變性。
1、Ames試驗
選用TA98和TA100作為試驗菌株,以亞硝基胍正定毒素和黃曲霉素B1作陽性對照。 用點試驗和標(biāo)準(zhǔn)平板試驗法,在加S-9和不加S-9的情況下鑒定聚氯化鋁的致突變性。聚氯化鋁配成10mg/ml的水溶液,經(jīng)高壓滅菌后供試驗用。
2、骨髓染色體畸變分析
用本所提供的昆明種小鼠(雄),選用體重40-50克小鼠25只,隨機分成5組,每組5只,第1組陽性對照,腹腔注射環(huán)磷酰胺100毫克/公斤.天,2-4組為試驗組,分別經(jīng)口給予聚氯化鋁1000、500、100毫克/公斤.天,第5組為陰性對照,給予自來水, 分別連續(xù)給藥5天,處死前給每只動物腹腔注射秋水仙素,劑量為4mg/kg,按常規(guī)方法取骨髓,制備骨髓染色體標(biāo)本,每只動物觀察100個中期分裂相染色體,記錄染色體數(shù)目,畸變類型和畸變細(xì)胞數(shù),計算畸變率,用X統(tǒng)計處理測定顯著性。
3.用本所提供的昆明種性成熟雄性小鼠50只,鼠齡8 -10周,體重35-40克,隨機分為5組,每組10只,第1組陽性對照,經(jīng)口給予甲基磺酸甲酯( MMS) 30毫克/公斤·天,連續(xù)3天,第2-4組為試驗組,分別給予聚臺氯化錨1000、500和1 00毫克/公斤·天,連續(xù)5天,第5組陰性對照組,經(jīng)口給予自來水。
選性成熟未交配過的雌小鼠,鼠齡8 -10周,體重35-40克,雌雄2:1同籠7 天,連續(xù)8個交配周期,每批雌鼠從雌雄同籠第1天算起,第17天剖腹取出子宮,檢查記錄活胎數(shù),死胎及早期吸收胎數(shù),總著床數(shù),算出顯性致死突變指數(shù)。
(二)結(jié)果:
1.Ames試驗結(jié)果表明,聚氯化鋁對TA98和TA100試驗菌株在有和沒有S-9的情況下,均無致突變性。點試驗結(jié)果:在TA98和TA100的試驗平板上,滴加lOOμg 聚氯化鋁的周圍未出現(xiàn)回變菌落圈,滴加1.0μg黃曲霉毒素Bi的周圍出現(xiàn)明顯的回變菌落圈。標(biāo)準(zhǔn)平板試驗結(jié)果顯示無論是直接致突變的陽性對照(亞硝基胍,正定霉素)還是需要代謝激活的陽性對照(黃曲霉毒素B1)均出現(xiàn)陽性結(jié)果,回變菌落數(shù)顯著增加,并且有明顯的劑量反應(yīng)關(guān)系.而聚氯化鋁不誘發(fā)回變,劑量達(dá)到 5000μg回變菌落數(shù)和空白對照回變菌落數(shù)相差無幾。
2.骨髓染色體畸變分析表明,聚氯化鋁劑量1000,500和100mg/kg組的染色體畸變細(xì)胞百分率分別是0.8、0.2和O,對照組為0.4,經(jīng)X檢驗,試驗紐和對照組無顯著差異.腹腔注射lOOmg/kg環(huán)磷酰胺的陽性對照組出現(xiàn)多種染色體畸變類型;裂隙、斷片、互換、無著絲點環(huán)等,染色體畸變細(xì)胞百分率為27.2 經(jīng)X2測定P 3.顯性致死試驗結(jié)果:陽性對照組,雄性小鼠經(jīng)口紿予甲基磺酸甲酯30毫克/公斤·天×3后,其峰反應(yīng)為第二交配周期(8~l4天),顯性致死突變指數(shù)為43.27。交配周期,多數(shù)雌鼠未受孕,只有二只受孕,雖然顯性致死突變指數(shù)為100,可以認(rèn)為是中毒反應(yīng)。聚氯化鋁劑量1000,500和lOOmg/kg組,其顯性致死突變指數(shù)在5.56~ 14.67范圍內(nèi),陰性對照組在5.07—11.84范圍內(nèi)變動.經(jīng)統(tǒng)計處理,無顯著性差異
(三)討論:三種致突變試驗結(jié)果表明,所有已知的致突變物的誘變試驗,都獲得了肯定的陽性結(jié)果。Ames試驗,骨髓染色體畸變分析和顯性致死試驗均表明聚氯化鋁無致突變性,鑒于致突變性和致癌性的高度相關(guān),因此可以判定煤矸石制取的聚氯化鋁無潛在的致癌危險性。